У всех животных при подозрении на демодекоз необходимо делать глубокий соскоб. Т.е. все животные с облысениями, папулами, пустулами, корками и межпальцевым пододерматитом должны быть обследованы на демодекоз. Эффективный глубокий соскоб с лап может потребовать седации или общей анестезии.
Важно определить количество взрослых особей (живых и мертвых), личинок (нимфы и яйца), в каждом малом поле зрения и отметить место соскоба. В дальнейшем ответ на лечение определяется путем сравнения этих цифр. Поэтому при мониторинге необходимо ежемесячно брать соскобы с одного и того же места.
Лечение демодекоза будет описано в дальнейших статьях по дерматологии.
^Наверхvetconsultplus.ru
Лабораторные методы ветеринарной дерматологии в значительной степени помогают не только подтвердить клинический диагноз, но и исключить другие виды нарушения. Некоторые из этих методов несложны в применении даже в кабинете врача, недороги (таблица 1) и дают быстрые или немедленные результаты. Сюда входят соскоб кожи, микроскопическое исследование шерстного покрова (трихография), взятие и микроскопическое исследование эпидермиса кожи, цитологическое исследование кожи и кожных инфильтратов, исследование шерстного и кожного покрова и грибковых культур при помощи лампы Вуда. Эти практические анализы при правильном их выполнении дают количественную и качественную информацию. Поэтому лечащий врач должен знать эти методы и умело пользоваться ими для получения надежных результатов.
| Лезвия скальпеля № 20Кюретка или двойная ложка ФолькманаВазелиновое масло и/или хлорлактофенол и/или 10% или 20% раствор КОНПредметные и покровные стекла (20 х 60 мм или 20 х 20 мм) Клей для закрепления стекол (Eukitt’s)Микроскоп с 4-, 10-, 40- и 100-кратными объективами и иммерсионным масломСтерильные кровоостанавливающие зажимыНовые зубные щетки в упаковкеНебольшие стерильные бумажные конвертыСелективная питательная среда на дерматофиты и питательная среда СабуроЧистая целлофановая пленкаЛактофенол коттон синийКровоостанавливающие зажимы с резиновыми насадкамиЩетка для вычесывания блох с 12 зубьями на смШприцы на 10 млВатные тампоныИглы №25Иглы №21Красители для цитологии (Diff-Quik или новый метиленовый синий)Спички или зажигалкаНожницы для стрижки шерсти |
Соскоб кожи должен выполнятся у собак и кошек во всех случаях алопеции или шелушения кожи. Соскоб выполняется при помощи лезвия скальпеля (№ 20 с рукояткой или без нее) или кюреткой (например, двойной ложкой Фолькмана и диаметром 5-7 мм). Кожу на выбранном участке нужно захватить зажимом и увлажнить каплей вазелинового масла. Зажав кожную складку между большим и указательным пальцами, нужно надавить на складку, сдавливая волосяные фолликулы, а затем несколько раз подряд произвести соскоб в направлении роста волос по тому же участку лезвием кюретки, держа инструмент под углом 45-90°. Спорифицированный материал для пробы нужно собрать на лезвие скальпеля. Затем сделать мазок из этого соскоба на предметное стекло и при необходимости добавить в него еще одну каплю вазелинового масла. Затем данная проба превращается в эмульсию с помощью масла на предметном стекле до тех пор, пока не станет однородной, после чего покрывается покровным стеклом (лучше всего размером 2×2см), и полученная проба тщательно проверяется под микроскопом с 4- и 10-кратным увеличением. Владельцы часто задают вопрос, нужно ли производить дезинфекцию участка соскоба; но, хотя в этом и нет необходимости, будет полезно произвести легкую дезинфекцию. В ветеринарной практике используются различные методы кожного соскоба, в зависимости от предполагаемых эктопаразитов. При исследовании кожного покрова на наличие клещей рода Demodexили личинок Pelodera,которые живут в волосяных фолликулах, нужно выполнить от 1 до 3 соскобов. Соскоб выполняют до появления капель крови (глубокий соскоб кожи). Соскоб кожи трудно произвести у животного с пододемодекозом из-за сильной болезненности данной процедуры, и даже при очень поверхностном соскобе возникает кровотечение вследствие воспаления и отека. В этом случае рекомендуется выполнить выдергивание волоса (см. ниже) на предмет наличия клещей. Соскоб кожи на Demodex, при правильном его выполнении, всегда помогает в диагностике, но при условии, что животное, имеющее данное заболевание, еще не подвергалось лечению.
Взятие соскоба с необходимой глубины представляет большие сложности или вообще невозможен для собак породы шарпей из-за слишком толстой дермы, характерной для этой породы. В данном случае, если имеется подозрение на демодекоз, а кожный соскоб дал отрицательные результаты, нужно произвести биопсию кожи для гистопатологического исследования.
При клещах Sarcoptesу собак соскоб кожи следует выполнять с большого участка (желательно 20 см2). Осторожно выбрив шерстный покров электрической машинкой, проводят поверхностный соскоб кожи, стараясь взять как можно больше чешуек для микроскопического исследования. В данном случае нет необходимости производить соскоб до появления капель крови. Лучшими участками для соскоба являются кожа в области наружной поверхности ушных раковин, на латеральной поверхности локтевой области и в любом другом месте, где имеются толстые чешуйки, узелки и желтые струпья. В кожных соскобах больных животных не всегда содержатся Sarcoptes, яйца и продукты их жизнедеятельности, даже если соскоб выполнен правильно. Поэтому отрицательный результат соскоба кожи не исключает наличие (зудневой) чесотки.
При чесотке у кошек легко найти клещей рода Notoedres,которые в изобилии содержатся в кожных соскобах. Эти соскобы нужно производить так же, как это было описано при саркоптозе у собак. Также можно выполнить поверхностный соскоб кожи для взятия чешуек, если имеется подозрение на заражение Cheyletiella, но этот метод является менее чувствительным, чем отпечаток на ацетатной пленке или сбор чешуек частым гребнем.
И наконец, можно сделать осторожный соскоб с поверхности кожи, особенно в случаях жирной себореи, для взятия мазка, который наносится на предметное стекло, окрашивается и исследуется на наличие Malassezia (см. обсуждение микроскопического исследования чешуек). Кроме вазелинового масла можно также использовать хлорфенолак (таблица 2) или 10-20%-ный раствор гидроксида калия (КОН). Эти вещества используются главным образом при обнаружении грибковых поражений. Вышеназванные вещества оказывают токсичное и раздражающее действие на кожу; поэтому кожный соскоб нужно выполнять сухим лезвием, а пробу после перемешать с каплей хлорфенолака или КОН на предметном стекле. Препарат, приготовленный с помощью КОН, нужно слегка разогреть на пламени горелки в течение 30 секунд или дать ему постоять 30 минут при комнатной температуре перед микроскопическим исследованием. Исследование препаратов с хлорфенолаком можно производить сразу же без подогревания.
| ХлорфеналакХлоралгидрат, 50 гЖидкий фенол, 25 млЖидкая молочная кислота, 25 млХлорфенолака нет в продаже, а имеются его составные части от поставщиков. Смешав ингредиенты, дайте смеси постоять 24-48 часов для растворения всех кристаллов. Лактофенол коттон синийКристаллы фенола, 20 гГлицерин, 40 мгМолочная кислота, 20 млДистиллированная вода, 20 млОсторожно подогрейте смесь на водяной бане для растворения всех компонентов. Затем добавьте 0,05 г краски коттона синего и хорошо перемешайте. Эта смесь продается в готовом виде. |
Микроскопическое исследование шерстного покрова является ценным методом, все чаще применяемым и играющим вспомогательную роль для других исследований (таблица 3). Волосы для пробы выдергивают из фолликулов в направлении роста волоса с помощью небольшого кровоостанавливаюгциего зажима с насадками резины на его браншах. Резиновые насадки на концах зажимов необходимы для того, чтобы захватывать волос на всех стадиях его развития, а не только на стадии телогена, когда он наиболее легко поддается депиляции. Затем волос помещают на каплю вазелинового масла, хлорфенолака или 10-20% раствора КОН на предметном стекле, накрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом. Или можно закрепить собранную пробу с помощью чистой ацетатной ленты на предметном стекле.
| Лампа ВудаКожный соскобВычесывание блохПоверхностный соскобМазок-отпечаток на ацетатной пленкеВыдергивание шерсти и трихографияЦитология | Заражение MicrosporumcanisЭктопаразитозы, дерматофития, заражение Malassezia(Pityrosporon)ЭктопаразитыСбор проб на грибковую культуруЭктопаразитозы, заражение MalasseziaДемодекоз, дерматофития, педикулез,Cheyletiella,алопецияОпухоли кожи, бактериальные и грибковые инфекции, Malassezia, пузырчатка, эозинофильный гранулематозный комплекс |
Трихография помогает при диагностике демодекоза, поскольку очень часто клещи извлекаются из фолликулов вместе с волосом, и их можно легко распознать под микроскопом с 4- или 10-кратным увеличением. Данный метод помогает также диагностировать дерматофитию, если внутри или на волосяных стержнях видны споры или гифы грибов. Данный тест является положительным в 60-70% случаев дерматофитии. Однако нельзя исключить наличие данного заболевания и при отрицательных результатах тестов, и необходимо произвести тест на присутствие грибковой культуры (см. ниже). В поисках дерматофитов желательно взять пробы волос, флюоресцирующих под лампой Вуда. Шерстный покров у здорового животного имеет ровную поверхность, в отдельных волосках легко можно различить наружный покров и сердцевину, а волос слегка сужается к его концу. Пораженный волос имеет неровную поверхность, в волосках неразличимы наружный покров и сердцевина, а кончики волос часто по форме напоминают куст. Споры представляют собой округлые тела, образующие цепи или группы на поверхности волосяного стержня и имеющие от 3 до 8 мм в диаметре.
Трихография также помогает при диагностике невоспалительной алопеции у собак и кошек. Обследование кончиков и корней волос помогает определить, обусловлено ли выпадение волос поведением самого животного (из-за вылизывания или расчесывания вследствие зуда) или происходит по другим причинам (эндокринопатия, дистрофия луковицы волоса). Если у волос большие пигментированные корни округлой формы, мягкие и растянутые на вид, изогнутые вследствие выдергивания (стадия анагена, наблюдаемая у нормально растущих волос), наряду с ломкостью кончиков волос, то, возможно, это является следствием самовылизывания и расчесов. Если большая часть или все корни тонкие, имеют форму палки, прямые и непигментированные (стадия телогена, характерная для нерастущего волоса в стадии отдыха), концы волос обычно сужены, то алопеция, по всей вероятности, происходит вследствие метаболических (например, гормональных) нарушений. В некоторыхтлучаях фолликулярной дисплазии или гнездной (очаговой) алопеции могут наблюдаться патологические деформированные волосяные луковицы (по сравнению с луковицами, взятыми у здоровой собаки той же породы и в тот же период линьки). Наблюдения за волосяным стержнем помогут установить алопецию с ослаблением окраса шерстного покрова. При здоровом волосяном покрове пигментированные гранулы меланина равномерно распределены по всему стержню, придавая шерсти однородный цвет. При алопеции с ослаблением цвета волоса пигментированные гранулы меланина группируются в макромеланосомы, которые искривляют и разрывают волосяную кутикулу. Эти пигментные нарушения заметны в волосе, собранном со всех участков тела, даже при желтой и рыжей окраске волоса, при которой не бывает алопеции.
Нарушения в центральной части волосяного стержня, такие как нарушение формы или разрыв кутикулы, могут наблюдаться в случаях недостаточного питания или повторных травм, причиненных волосам (от чрезмерного расчесывания), или при редком заболевании под названием Trichorrehexisnodosa. При заболеваниях с образованием угревой сыпи и гиперкератозе (включая эндокринопатию, аденит сальных желез, демодекоз и витамин А-зависимый дерматоз), при возникновении кератиновых фолликулярных слепков, присущих волосяным стержням, эти нарушения надо отличать от дерматофитных гиф и спор. Данное вещество является аморфным, образованным несколькими слоями кератина, и часто содержит тонкие закрученные вторичные волоски, которые вследствие закупоривающей массы кератина не способны достигнуть поверхности кожи.
Можно увидеть гниды вшей и яйца Cheyletiella, прикрепленные к волосяному стержню, причем последние гораздо меньших размеров и держатся на стержне менее крепко, чем первые.
Микроскопическое исследование чешуек и остатков кожного покрова позволяет установить некоторых эктопаразитов, таких как блохи, Cheyletiella и вши. Чешуйки можно собрать, если поместить животное на черную или коричневую бумагу, быстро провести против шерсти и собрать все, что упало на бумагу. Или можно воспользоваться расческой для вычесывания блох с 12 зубьями на сантиметр. Собранный материал нужно смешать с вазелиновым маслом, хлорфенолаком или раствором КОН (см. выше), прикрыть покровным стеклом и посмотреть его под микроскопом. Клещи Cheyletiella, вши, яйца и экскременты блох можно легко распознать при четырехкратном увеличении. Получить сразу большое количество чешуек можно с помощью метода флотации. Собранный материал в течение короткого времени подогревают в небольшом количестве 10% КОН, затем погружают в насыщенный раствор сахара или в флотационную среду для исследования фекалий, а затем центрифугируют. Всплывающие на поверхность частицы собирают пипеткой и помещают на предметное стекло, прикрывают покровным стеклом и исследуют при 4-кратном увеличении. Данный метод особенно помогает, если имеются подозрения на наличие Cheyletiella, поскольку этих клещей обычно немного.
Чешуйки также можно собрать, прижимая полоску ацетатной липкой ленты по нескольку раз между отдельными волосками. Затем пленку прижимают к предметному стеклу липкой стороной вниз и смотрят под микроскопом. Данный метод также подходит для взятия себорейного материала после цитологического окрашивания (см. далее) для обнаружения Malassezia (Pityrosporon) на чешуйках кератина.
МетодикаПредметные стекла следует заранее протереть 70%-ным спиртом для улучшения адгезии пробы. В зависимости от вида повреждения применяются различные методы цитологического взятия проб. Метод получения материала путем аспирации тонкой иглой чаще всего применяется при плотных поражениях. После аккуратного выбривания места взятия материала и дезинфекции поверхности, в центральную часть поражения вводят иглу №21 с присоединенным к ней шприцом на 10 мл и стараются набрать содержимое поражения в количестве 2 мл, потянув на себя поршень шприца. Не отпуская поршня шприца, иглу перемещают в разных направлениях внутри поражения (3-4 раза). Перед извлечением иглы из поражения поршень шприца отпускают для предотвращения поступления материала внутрь шприца. Затем иглу (содержащую пробу) отсоединяют от шприца, 10 мл воздуха набирают в шприц, после чего шприц снова соединяют с иглой. И, наконец, собранный материал помещают на предметное стекло путем быстрого надавливания на поршень шприца. Если полученного материал слишком много или он слишком жидкий, его можно распределить на несколько предметных стекол. Аспирация с помощью шприца также производится для взятия проб из кист, абсцессов, больших везикул и пустул.
При открытых, экссудативных поражениях и жирных себорейных поверхностях, а также из свежих поверхностей разреза после кожной биопсии или удаленных узелков рекомендуется брать мазки-отпечатки. При данном методе предметное стекло просто несколько раз прижимают (не оставляя полос) к месту поражения. Аналогичным образом можно собирать гной из пустул и под корками на коже после предварительного аккуратного из вскрытия иглой №25.
Цитологические пробы можно брать в виде мазка из фистул, из областей с глубокой пиодермией, из наружного слухового прохода или увлажненным тампоном с жирной поверхности кожи. Тампоном с пробой затем осторожно проводят по предметному стеклу. Всем цитологическим пробам нужно дать высохнуть на предметном стекле. Предметные стекла с пробами сальных желез или воском или пробами, собранными увлаженным тампоном, нужно перед окрашиванием слегка подогреть на огне спиртовой горелки, В цитологии чаще всего используются быстрые красители, в том числе модифицированные красители Райта (Diff-Quik, Hemacolor) и новый метиленовый синий. Другие красители, удобные или требующие специального лабораторного оборудования, такие, как для окрашивания по граму, PAS и красители May-Gnnwald-Giemsa, редко бывают необходимы.
После окрашивания предметные стекла быстро промывают водопроводной водой, дают высохнуть и исследуют под микроскопом с 10-, 40- и 100-кратным увеличением под инверсией. Чтобы полученный препарат сохранялся дольше, можно приклеить покровное стекло на предметное стекло специальным клеем (например, Eukittили Accu-Mount60, BaxterHealthcareСогр.). Препараты на ацетатной ленте также надо окрасить, промыть и прижать к предметному стеклу микроскопа клейкой стороной к стеклу.
ИнтерпретацияИсследование проб, взятых из узелков, помогает выявить наличие воспаления (такие клетки, как нейтрофилы, макрофаги, лимфоциты и клетки плазмы крови) или неоплазии. В воспалительном экссудате часто можно обнаружить присутствие бактерий и оценить их количество, форму и местоположение (внутриклеточные или внеклеточные). При цитологическом исследовании видимые бактерии обычно являются кокками (в основном Staphylococcus). В редких случаях можно наблюдать палочки или смешанные инфекции (кокки и палочки). Палочки невозможно идентифицировать при помощи одного цитологического метода; поэтому для обнаружения внутриклеточных палочек или смешанных инфекций нужен анализ бактериальной культуры. Лишь внутриклеточные бактерии (обычно в дегенеративных утолщенных нейтрофилах) свидетельствуют о наличии пиодермии. Во многих случаях глубокой пиодермии наблюдается мало внутриклеточных бактерий, но обнаружено много нейтрофилов и макрофагов, а также некоторое число лимфоцитов и клеток плазмы. Присутствие внеклеточных бактерий говорит о заражении или об очень поверхностной пиодермии (например, «горячих пятнах»). Дрожжевая инфекция Malassezia редко присутствует в пробах, взятых со здоровой кожи, но она может находиться в пробах, взятых из здорового слухового прохода, и в обильном количестве содержится в пробах, взятых при жирной себорее или церуминальном отите. Эти дрожжевые грибы обладают гораздо большей величиной, чем большинство бактерий, по форме напоминают бутылку или земляной орех (проросшие дрожжи), и при окрашивании их цвет меняется от светло-голубого до темно-фиолетового при наблюдении проб, окрашенных модифицированным красителем Райта. Malassezia всегда бывает внеклеточной и часто прилипает к корнеоцитам. В пробах, взятых с кожи или из лимфатических узлов, иногда встречаются и другие микроорганизмы, например возбудители глубокой грибковой инфекции или Leishmania. При предполагаемом криптококкозе очень полезно смешать каплю черных китайских (или индийских) чернил с экссудатом для определения капсулы муцина, которая четко выделяется на темном фоне.
Стерильные пустулы с хорошо выраженными нейтрофилами, различным количеством эозинофилов и акантолитическими клетками с большой вероятностью указывают на пемфигоидный комплекс. Акантолитические клетки представляют собой маленькие темные округлые кератиноциты базального или шиповидного слоя, которые отделяются от окружающих клеток вследствие разрыва внутриклеточных соединений. Клетки-родоначальники больших размеров с прямыми краями и углами нельзя считать акантолитическими клетками, это обычные десквамативные корнеоциты. Настоящих акантолитических клеток особенно много у кошек при пузырчатке, и для них характерны массовые скопления. Некоторое количество акантолитических клеток иногда наблюдается в пустулах вследствие бактериальной инфекции. В этом случае они не так многочисленны и не скапливаются в больших количествах, и бактерии ясно видны внутри нейтрофилов. Бактерии наряду с акантолитическими клетками также наблюдаются в пробах, взятых из-под корок при пузырчатке, которая вероятнее всего является вторичной инфекцией. В таких осложненных случаях желательно выполнить несколько биопсий кожи и направить их дерматопатологу для окончательного диагноза.
Эозинофилы, основной тип клеток, выявляются в поражениях при эозинофильном гранулематозном комплексе у кошек, при эктопаразитозах (чесотка, блохи, назальная пиодермия вследствие укусов членистоногих), у собак иногда из-за корма или контактной аллергии и в редких случаях при стерильных эозинофильных пустулёзных высыпаниях. Зрелые поверхностные корнеоциты встречаются в пробах, взятых с поверхности кожи, или при аспирационной биопсии из фолликулярных кист. Эти корнеоциты представляют собой большие плоские светло-голубые безъядерные клетки с острыми краями, которые кажутся темно-синими, если располагаются в форме сигареты.
Исследование кожи и шерстного покрова при помощи лампы Вуда помогает при диагностике дерматофитии, вызванной Micmsporumcanis. Лампа Вуда дает ультрафиолетовое свечение с длиной волны 253,7 нм, проходящее через кобальтовый или никелевый фильтр. Желательно использовать лампы с увеличительным стеклом. Исследование должно производиться в совершенно темной комнате. Чтобы лампа излучала требуемую длину волны, ей нужно дать подогреться в течение 5-10 минут. Лучше всего провести это время в темноте, чтобы дать привыкнуть глазам. Почти 50% штаммов М. canisфлюоресцируют под действием УФ излучения в результате образования метаболитов триптофана. Положительная флюоресценция обычно дает характерную яблочно-зеленую окраску и может наблюдаться у корней волос наподобие манжеты, обрамляющей интрафолликулярные и экстра фолликулярные участки волосяного стержня. Часто волос, дающий положительное свечение, бывает ломким на внешней части поражения. Иногда можно увидеть чешуйки, говорящие о наличии заболевания. Ложноположительное свечение имеет другой цвет (белый, светло-голубой) и бывает вызвано чешуйками, остатками шерсти, нанесением препаратов, бактериями (Pseudomonas) или закупоривающей массой кератина вокруг волосяного стержня. Для подтверждения положительного анализа желательно собрать флюоресцирующий волос, исследовать его под микроскопом на наличие грибковой инфекции (см. выше) и использовать часть пробы для посева грибковой культуры.На некоторые грибковые штаммы нужно освещать в течение нескольких минут, пока они не дадут характерного свечения. Таким образом, нужно держать лампу над областью поражения по крайней мере в течение 5 минут, прежде чем прийти к выводу, что тест является отрицательным. Половина штаммов М. canisи все виды Trichophyton, заражающие домашних животных, не дают свечения, поэтому отрицательный тест, полученный при исследовании с помощью лампы Вуда, не исключает наличие дерматофитии. В сомнительных случаях следует взять провести культивирование на грибы.
Культивирование грибов имеет важное значение, если есть подозрение на дерматофитию, а трихография и исследование с помощью лампы Вуда дали отрицательный результат. Во избежание усиления контаминации пораженный волос зажимают на расстоянии 1 см от кожи и место поражения слегка дезинфицируют 70%-ным спиртом, а затем дают высохнуть. После этого ломкий и светящийся волос, а также чешуйки и шерсть на внешней части поражения собирают стерильными гемостатическими зажимами и помещают либо в небольшой бумажный конверт для последующей инокуляции, либо вносят сразу в питательную среду. Нужно следить за тем, чтобы как можно больше собранной пробы находилось в контакте с питательной средой, так как только из спор, соприкасающихся со средой, может развиться мицелий гриба. Для животных с отсутствием поражений (особенно у кошек с отсутствием симптомов, которые предположительно считаются переносчиками заболевания, или у животных, у которых производится последующее высевание культуры после курса лечения) желательно применять метод Мак-Кензи с использованием зубной щетки. Можно использовать новые зубные щетки в индивидуальных пакетах, поскольку благодаря их оригинальной упаковке они обычно микологически стерильны. Нужно расчесать все тело животного, в особенности участки, предрасположенные к дерматофитии, такие как область морды, ушных раковин и передних лап. Также нужно осторожно собрать небольшое количество волос с зубной щетки. Затем надо несколько раз осторожно прижимать щетку к питательной среде, после чего равномерно распределить волос и прижать его ко всей поверхности чашки Петри.
Измельченные когти животного и остатки кожи, собранные кюреткой с когтевого ложа или под вогнутой передней частью когтя, также нужно исследовать на наличие грибковой культуры. Следует избегать инокуляции экссудатов и проб, недавно подвергнутых местной противогрибковой терапии. Чашки Петри и бутылки с внесенным в них материалом необходимо держать неплотно закрытыми и хранить при комнатной температуре (20-25 °С) в темноте, при относительной влажности не выше 30%. Коробка из-под обуви со стаканом воды внутри может служить хорошим домашним инкубатором. Посевы следует внимательно осматривать ежедневно в течение по крайней мере 14 дней. Если по прошествии 2 недель не видно роста культуры, она считается отрицательной.Наиболее часто применяемой средой для культивирования является питательная среда на дерматофиты (DTM). Среда содержит гентамицин и хлортетрациклин, убивающие бактерии, а также циклогексимид, задерживающий рост сапрофитных грибков. Некоторые патогенные грибки, такие как Cryptococcus, некоторые виды Aspergillus, Zymomycota и возбудители феогифомикоза чувствительны к циклогексимиду и не растут в данной питательной среде. DTM также содержит фенол красный в качестве индикатора pH, который в щелочной среде меняет желтый цвет на красный. Дерматофитные грибы вначале используют протеины в качестве питания, образуя при этом щелочные метаболиты, которые и вызывают красный цвет индикатора, как только будет замечен рост мицелия. Сапрофитные грибы потребляют углеводы, вначале образуя кислотные метаболиты, при которых цвет индикатора остается желтым. В конечном итоге при достаточно длительном выращивании культуры (10 дней и более) и обеднении данной среды углеводами сапрофитные грибы также начнут использовать протеины в качестве питания, и цвет индикатора изменится на красный.
Важно отметить, что при наличии сапрофитных грибов изменение цвета среды произойдет после того, как разовьется мицелий и будет ясно видимой в течение нескольких дней. Поэтому нужно ежедневно следить за ростом культуры, высеянной на наличие грибковой микрофлоры, и изменением цвета индикатора. Поскольку другие грибы, такие как Blastomyces, Sporothrix, Histo-plasma, Coccidioid.es, и некоторые виды Aspergillus также быстро придают DTM среде красный цвет, необходимо произвести макроскопическое и микроскопическое исследование культуры для определения видовой специфичности грибов. Макроскопическое исследование верхней и нижней поверхности части культуры лучше всего производить при инокуляции пробы или при взятии параллельных проб от субкультуры на агар Сабуро и на агар с DTM. Microsporumcanisдает ватообразную колонию беловатого цвета с желтовато-оранжевым центром в нижней части. Microsporumgypseumдает плоскую светло-коричневую колонию с гранулярной поверхностью и бледно-желтой нижней частью.
Микроскопическое исследование макроконидий лучше всего производить не ранее чем через 5-7 дней после первого наблюдения роста мицелия, желательно на среде Сабуро. В продаже представлены среды с быстрым спорулированием, но их преимущества вызывают сомнение. Кусок чистой ацетатной ленты осторожно прижимают к поверхности колонии так, чтобы ее часть прилипла к ленте. Ленту кладут на каплю коттона синего лактофенола клейкой стороной вниз на предметное стекло микроскопа и исследуют под микроскопом при 10- и 40-кратном увеличении. У макроконидий Macrosporumcanisформа веретена с толстыми стенками из шести и более клеток и шишкообразные окончания. У Microsporumgypseum макроконидии в форме веретена с тонкими стенками, без шишкообразных окончаний и шесть или менее клеток. Макроконидии Т. mentagrophytes обнаружить трудно, они имеют форму сигары и тонкие стенки. Trichophytonmentagrophytes лучше всего выявляется по спиральным гифам и микроконидиям в форме винограда, которых всегда много и их легко увидеть.
canis-vet.ru
Если вы обеспокоены состоянием кожи или шерсти вашего питомца, проконсультируйтесь с ветеринарным врачом, который проведет тщательный осмотр с применением одного или нескольких диагностических методов.
Ответная реакция и лечениеВетеринарный врач, обследовав вашу собаку и поставив диагноз, назначит лечение, например проведение обработки против паразитов или антибиотикотерапию.
Соскоб кожиВетеринарный врач аккуратно с помощью скальпеля выполнит соскоб с пораженного участка кожи и исследует его под микроскопом. Этот тест эффективен для идентификации чесоточных клещей, например Demodex.
Совет ветврачаСуществуют восемь основных признаков кожных заболеваний, к которым должны быть внимательны владельцы собак: очаговое или более сильное, чем в период линьки, выпадение шерсти; изменение пигментации; заметные глазом новообразования; интенсивное расчесывание или вылизывание; воспаление; шелушение и образование коросты; эрозии, глубокие язвы.
Мазок-отпечатокВетеринарный врач плотно прижимает липкую ленту к пораженному участку кожи, затем убирает эту ленту и исследует полученный мазок-отпечаток под микроскопом. Таким образом можно диагностировать дрожжи Макзетта, клещей чилетелла, бактерии.
Биопсия кожиБиопсия кожи — чрезвычайно информативная процедура, с помощью которой можно с высокой вероятностью диагностировать заболевание кожи. Биопсию проводят с помощью шприца, получают образец клеток кожи, который исследуют под микроскопом.
Бактериальная или грибковая культураДля получения бактериальной и грибковой культуры с пораженного участка кожи выполняют посев. Это дает возможность врачу идентифицировать возбудителя инфекции.
Исследование люминесцентным методомОбразец шерсти помещают под ультрафиолетовые лучи в темной комнате. Шерсть, пораженная грибами рода Microsporum canis, будет светиться ярко-зеленым светом.
Внутрикожное тестированиеДля выявления специфических причин аллергического зуда в кожу вводят небольшие количества возможных аллергенов, таких как пыльца, пылевые клещи, перхоть человека, слюна блох. Затем исследуют место инъекции на предмет местного воспаления. Процедуру выполняет опытный ветеринарный врач-дерматолог.
Тестирование с помощью метода elisaELISA проводят с целью выявления антител к аллергену в сыворотке крови собаки. Надежность этого теста высокая, что дает возможность широкого его применения в ветеринарной практике для точной диагностики причин аллергии у собак.
Патч-тестированиеПатч-тестирование применяют для диагностики аллергического контактного дерматита. Предполагаемые аллергены наносят с помощью патча на кожу; позже исследуют кожу в этом месте на наличие воспаления.
Анализы кровиГормональный дисбаланс вызывает различные кожные изменения. Для определения уровня содержания гормонов проводят анализы крови. Аутоиммунные заболевания диагностируют с помощью иммунологического тестирования крови.
Изменения в диетеКомпоненты пищи, в особенности белки, могут вызывать кожный зуд. Переход на специальную диету, когда в рационе собаки содержатся белки и углеводы, которых собака никогда не получала раньше, в течение, по крайней мере, 4-6 недель поможет диагностировать причину пищевой аллергии.
uhod-za-sobakoj.ru
Соскобы и болезни кожи животных (дерматология)Scrapes and skin diseases
Кожа, или кожный покров, является самым большим органом тела. Ее масса от общей массы тела животного в среднем составляет от 6 до 9%. У разных видов животных толщина кожного покрова подвержена значительным колебаниям, что зависит от многих причин, из которых наибольшее значение имеет среда обитания. Являясь внешним покровом всего тела, кожа предохраняет ткани, находящиеся под кожей, от внешних неблагоприятных воздействий.
Заболевания кожи, кожных покровов, их диагностику и лечение изучает Дерматология.
С уверенностью можно предположить, что каждому владельцу приходилось сталкиваться с заболеваниями кожи у своего питомца. Зачастую проявления у них похожие: расчесы, кожный зуд, поредение шерсти (или ее выпадение на определенном участке кожи животного), корочки, чешуйки, покраснения, причиной которых могут быть эндокринные нарушения, нарушения работы внутренних органов вызванные погрешностями в рационе питания, аллергии, воспалительные процессы, вызванные травмами, термическими воздействиями (обморожения или ожоги), так и влиянием воздействия паразитов, для которых обитание на поверхности и глубоко в коже является благоприятной средой существования.
Решают такие проблемы владельцы по-разному. Одни сразу же обращаются к ветеринарному врачу, другие начинают применять средства народной медицины.
Все же, мы настоятельно рекомендуем начинать лечение любой кожной проблемы с обращения в ветеринарную клинику, не смазывая самостоятельно кожу йодом, дегтем или другими аптечными мазями. У нас нет возражений против этих средств, но зачастую после их несоответствующего применения зона пораженной кожи увеличивается, захватывая все новые участки здоровой кожи собаки, кота или грызуна.
Врачу необходимо увидеть проблему в ее естественном виде, без наложения эффектов от воздействия других препаратов. Это существенно облегчает постановку диагноза и улучшает лечение.
Заметим, что не всегда достаточно одного лишь осмотра, даже для самого опытного врача. Необходимо ответить на вопрос, какой природы наблюдаемое заболевание: то ли это аллергия, лишай, клещ, или что-то другое? Тем более после применения каких-либо наружных средств, когда очаги поражения покрываются толстыми корками и к этой поверхности присоединяется вторичная бактериальная или грибковая инфекция.Существует много исследований для установления причины кожных заболеваний, но наиболее информативным является соскоб кожи.
Итак, соскоб кожи - наиболее часто используемая диагностическая процедура. Простая и быстрая, данная техника диагностики проводится для определения многих видов паразитарных заболеваний, таких как клещи Demodex, Sarcoptes, Otodectes и др.. Каким образом выполняется соскоб кожи у животного? Прежде всего, очаги поражения нельзя ничем обрабатывать, даже водой. Поясняем, если кожа животного поражена клещами, нанесенная мазь заставит клещей покинуть очаг, и понадобится более недели, чтобы появилось поредение шерсти в других местах.
Для проведения самого процесса кожных соскобов понадобятся: предметные и покровные стекла, минеральное масло, лезвие скальпеля и микроскоп.
Для получения поверхностного соскоба достаточно поскоблить кожу стерильным лезвием. При подозрении на наличие подкожных клещей, которые живут глубоко под кожей, а именно паразитируют не только на поверхности кожи, но и в волосяных фолликулах, протоках сальных желез. В таком случае соскобы отбирают глубокие. Пользуясь стерильным лезвием, до появления капли капиллярной крови, взятое содержимое переносится на предметное стекло с каплей минерального масла и накрывается покровным стеклом, далее содержимое исследуется под микроскопом. Если есть вероятность наличия ушных клещей, то для их выявления нам понадобится взять образец содержимого ушных раковин при помощи ватного тампона, затем перенести так называемое «корочки», которые врач достал из уха, на покровное стекло для микроскопии.
Может случиться и так, что результаты соскоба окажутся отрицательными, так как кожные проявления могут свидетельствовать о проявлении какого-либо не паразитарного заболевания (аллергии, сахарного диабета, заболевания внутренних органов).
Обращаем ваше внимание, что кожа для организма, является защитной броней, и она по своей сути уязвима, и является отображением состояния организма. Так, заметив необычные проявления в поведении животного (беспокойное расчесывание кожи, корочки, шелушение) обращайтесь к ветеринарному врачу. В случае своевременного обращения к ветеринару в несколько раз облегчается диагностика, лечение и улучшается его результат.
Врачи ветеринарной клиники Котофей.Все права на статью защищены.
kotofey.dp.ua
Каждая собака и кошка с сальной шерстью и зудом может быть поражена хейлетиеллой, отодектозом, саркоптозом или нотоэдрозом. При этих заболеваниях необходимо брать соскобы.
Обнаружение одного яйца или клеща является признаком, достаточным для постановки диагноза. Отрицательный результат не исключает присутствие клеща и заболевания. Хейлетиелла и отодектоз также могут отсутствовать в поверхностном соскобе. Следующим шагом будет терапевтическое исследование, возможно в сочетании с другими диагностическими тестами, с такими как: элиминационная диета, что поможет выяснить другие причины чесотки.
^Наверхvetconsultplus.ru
Исследование соскобов кожи проводится при помощи световой микроскопии с целью обнаружения паразитов для подтверждения диагноза.
Собаки
При помощи данного исследования у собак можно диагностировать такие паразитарные заболевания, как саркоптоз и хейлетиеллёз. Поражение этими паразитами почти всегда связано с сильным зудом и борьба с ними примерно одинакова.
Хейлетиеллёз – заболевание, вызываемое клещами рода Cheyletiella. Кроме собак они встречаются также у кошек и кроликов. Хейлетиеллы живут в роговом слое эпидермиса, нередко их можно увидеть и невооружённым глазом в виде «гуляющей перхоти». При хейлетиеллёзе обычно поражается кожа спины, а также может поражаться кожа в области носа. У собак наблюдают зуд, себорею, на более поздних стадиях алопеции и эрозии на коже.
Саркоптоз, или собачья чесотка – заболевание, вызываемое клещами рода Sarcoptes. Саркоптесы обитают на коже с невыраженным шерстным покровом (на ушных раковинах, в области скакательных суставов, на животе). У собак при саркоптозе чаще наблюдают зуд и алопеции на ушных раковинах, скакательных суставах и животе. При хроническом течении отмечают гиперпигментацию (почернение) и утолщение кожи.
Кошки
В соскобах можно обнаружить представителей рода Cheyletiella, вызывающих подобное заболевание у собак – хейлетиеллёз.
Другое заболевание - нотоэдроз – вызывается клещом Notoedres cati. Чаще всего болеют представители семейства кошачьих. Кроме кошек нотоэдрозом болеют кролики, белки, крысы. Клещи рода Notoedres паразитируют и развиваются в верхних частях эпидермального слоя кожи, вызывая облысение кожи головы, шеи, лопаток, передних конечностей, а также передней части туловища. На коже наблюдают корочки и струпья, кожа в местах поражения утолщается, сморщивается и отвердевает, животные испытывают сильный зуд.
Кролики
У кроликов при исследовании соскобов можно диагностировать такие заболевания, как хориоптоз, псороптоз и хейлетиеллез.
Хориоптоз кроликов – заболевание, вызываемое клещом Chorioptes cuniculi. Клещи локализуются на коже наружной и внутренней поверхностей ушных раковин, на голове, реже на лапах и спине. На коже наблюдают алопеции, покраснение, мелкие корочки. Животные испытывают зуд, возможно проявление симптома «кривоголовости».
Псороптоз кроликов – заболевание, вызываемое клещом Psoroptes cuniculi. Псороптесы паразитируют у кроликов на ушных раковинах и в слуховом проходе, вызывая сильный зуд. В слуховых проходах появляются корочки и струпья, возможно проявление симптома «кривоголовости».Хейлетиеллез – заболевание, вызываемое клещами рода Cheyletiella, встречается довольно редко. У кроликов клещи паразитируют на коже головы, ушей и спины. Заболевание проявляется зудом, выпадением шерсти, наличием корочек и папул на пораженной коже.
Птицы
Кнемидокоптоз – заболевание, вызываемое клещом рода Knemidokoptes. Поражаются участки тела, лищённые перьевого покрова – лапы, лицевая часть головы.
МатериалМатериалом для исследования служат соскобы с кожи.
Для исследования на хейлетиеллез делают поверхностный соскоб с поражённой кожи или используют прозрачную липкую ленту, прижав её к поражённому месту, затем приклеивают её на предметное стекло и доставляют в лабораторию.
Чтобы диагностировать саркоптоз и нотоэдроз, необходимо сделать глубокий соскоб кожи (до появления капель крови) на границе очага поражения.
Полученный материал переносится на стекло с каплей вазелинового масла и доставляется в лабораторию.
Для диагностики псороптоза и хориоптоза делают соскоб из слухового прохода с помощью ватного тампона, затем полученный материал переносят на стекло с вазелиновым маслом и доставляют в лабораторию.
Интерпретация результатовЕсли в соскобе обнаружены паразиты или их яйца, можно говорить о наличии заболевания.
Если в соскобе паразиты или их яйца не обнаружены, можно говорить об отсутствии заболевания.
Ложноотрицательный результат
Отсутствие паразитов в соскобе не всегда свидетельствует об отсутствии заболевания, например, при диагностике саркоптоза собак, следует помнить о том, что частота диагностических находок составляет лишь 20%, то есть в соскобах очень трудно обнаружить клеща или его яйца. В этом случае врач при наличии классической картины может назначить лечение, несмотря на отрицательный результат соскоба.
Помимо клещей, в соскобах могут встречаться яйца власоедов и вшей, крепко приклеенные к шерсти животных, а также взрослые паразиты.
Иногда исследование соскобов сочетают с исследованием мазков-отпечатков на обнаружение бактериального или грибкового воспаления.
Меркитанова М.А.Ветеринарный врач-лаборант лаборатории «BIOVETLAB»
www.biovetlab.ru
Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности для лабораторной диагностики демодекоза у собак. Для повышения лабораторной диагностики, уменьшения травматизации, болезненности и беспокойства животного при взятии соскоба предложен щадящий метод, отличающийся отсутствием побочных явлений после исследования. Он основан на осторожном вытягивании волоса с волосяным фолликулом при помощи кровоостанавливающего зажима З-115 ГОСТ 19126-79, содержимое колоний переносили на предметное стекло в каплю очищенного керосина и просматривали всю площадь препарата под малым увеличением микроскопа.
Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности для лабораторного исследования демодекоза у собак.
Известен паталогогистологический метод исследования кожи. Для исследования вырезают кусочек кожи в форме квадратика или кружка площадью около 1 см2, растягивают его на деревянной или пробковой пластинке при помощи шелковой нитки, фиксируют в 12% растворе нейтрального формалина несколько дней, а затем обрабатывают в соответствии с правилами гистологической техники (Кожные болезни животных, В.А.Соколовский, М.А.Палимпсестов, М., 1968, 60 с.).
Известен способ взятия соскоба у собак при помощи острого скальпеля, который держат почти параллельно поверхности кожи, или ложки с заточенными краями производят глубокий, до появления крови, соскоб (срезают или сдирают поверхностные слои кожи). Полученный таким образом материал помещают в бактериологическую чашку или часовое стекло. Затем собранные соскобы заливаются 10% раствором едкого кали или натра на 12 часов до размягчения и частичного растворения корок. Этот процесс можно ускорить подогреванием в течение 15-20 минут или легким кипячением корок в тех же растворах. После того как корки размягчатся, их по кусочкам переносят на предметные стекла, покрывают покровным стеклом и микроскопируют (Чесоточные клещи, В.Б.Дубинин, Изд. Советская наука, М., 1954, 72 с. - прототип).
Однако известные методы отличаются высокой травматизацией животных, т.к. материал для исследования берут из нескольких мест поражения, глубоко проникая в кожу (до появления крови), вызывая в дальнейшем осложнения вторичной инфекцией, причиняя владельцу животного дополнительные беспокойства. К тому же методы требуют много времени для проведения диагностики, специальной аппаратуры.
Техническим решением задачи является повышение эффективности лабораторной диагностики демодекоза у собак за счет уменьшения травматизации животного, без больших затрат времени и аппаратуры.
Поставленная задача достигается тем, что в способе исследования демодекоза у собак, включающем взятие соскоба, помещение его в растворитель и микроскопирование, взятие соскоба осуществляют путем удаления волоса с фолликулом посредством кровоостанавливающего зажима, а в качестве растворителя используют очищенный керосин.
Новизна в предложенном способе обусловлена тем, что отсутствуют побочные явления после проведенного исследования, поскольку основан на осторожном вытягивании волоса с волосяным фолликулом при помощи кровоостанавливающего зажима З-115 ГОСТ 19126-79 и дальнейшего микроскопического исследования.
Кроме того, новизна предложения обусловлена тем, что применение кровоостанавливающего зажима в лабораторной диагностике обеспечивает уменьшение травматизации животного, безболезненность и снижает риск заболевания вторичной инфекцией.
По данным патентной и научно-технической литературы не обнаружена аналогичная совокупность признаков, что позволяет судить об изобретательском уровне предложения.
Пример конкретного осуществления способа взятия соскоба у собаки при демодекозе.
При взятии соскоба фиксируют собаку за голову при помощи ошейника и поводка, взятие соскоба лучше проводить на полу, чтобы не вызывать беспокойство собаки. Врач-лаборант подходит спереди, окликивает животное по кличке, поглаживает и осматривает пораженные места. Затем на границе здорового и пораженного участков врач берет соскоб. Он основан на осторожном вытягивании волоса с волосяным фолликулом при помощи кровоостанавливающего зажима З-115 ГОСТ 19126-79 и дальнейшего микроскопического исследования. Содержимое колоний переносят на предметное стекло в каплю очищенного керосина и просматривают всю площадь препарата под малым увеличением микроскопа марки Ломо Микмед - 1, объектив 10, окуляр 10. Обнаружение мелких червеобразных клещей рода Demodex canis в соскобах кожи позволяет точно поставить диагноз и дифференцировать демодекоз от саркоптоза, отодектоза и других инфестаций. Болезненность при таком взятии соскоба практически отсутствует, волос свободно вытягивается, т.к. при демодекозе волос выпадает сам вследствие размножения клещей рода Demodex canis в волосяных фолликулах и сальных железах.
Способ исследования демодекоза у собак при помощи кровоостанавливающего зажима повышает эффективность лабораторной диагностики, так как уменьшается травматизация собаки за счет осторожного вытягивания волоса с фолликулом, время взятия соответственно уменьшается. Затраты времени на проведение исследования незначительные благодаря очищенному керосину, при добавлении которого происходит размягчение и просветление соскоба. К тому же соскоб на предметном стекле не засыхает в течение 10 минут, а в случае необходимости можно добавить еще раз каплю керосина в тот же соскоб и еще раз микроскопировать. Во время проведения диагностики при помощи скальпеля возможна самотравматизация животного, так как соскоб берут глубокий до появления крови, время взятия увеличивается, к тому же соскоб на предметном стекле очень быстро засыхает (4 минуты). После проведения исследования при помощи скальпеля необходимо провести обработку дезинфицирующим средством для предотвращения попадания вторичной инфекции.
Способ исследования демодекоза у собак, включающий взятие соскоба, помещение его в растворитель и микроскопирование, отличающийся тем, что взятие соскоба осуществляют путем удаления волоса с фолликулом посредством кровоостанавливающего зажима, а в качестве растворителя используют очищенный керосин.
www.findpatent.ru
Pragueratter | Все права защищены © 2018 | Карта сайта
